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防脫發(fā)——機(jī)理與成分匯總

 秋原勁草 2024-09-11 發(fā)布于四川

隨著人們生活節(jié)奏不斷加快,生活和工作壓力變大,脫發(fā)已成為社會人群普遍面臨的問題。

根據(jù)國家衛(wèi)生健康委員會的統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù),2019年中國有超過2.5億人有脫發(fā)問題,多達(dá)40%的女性和50%的男性都曾受到頭發(fā)稀疏的困擾,近年來,脫發(fā)問題也呈現(xiàn)出低齡化趨勢,另外幾乎所有人隨著年齡增長都會有發(fā)際線上移的煩惱。

因本文內(nèi)容較多,為方便閱讀,以下列出本文主要內(nèi)容目錄:

  • 脫發(fā)的原因

    • 雄激素脫發(fā)

    • 免疫性脫發(fā)

    • 其他原因

  • 防脫發(fā)機(jī)理

    • 抗雄激素作用

    • 調(diào)控毛囊生長周期

    • 減少毛囊損傷

    • 改善微循環(huán)和能量代謝

  • 防脫發(fā)成分

    • 藥物防脫發(fā)成分

    • 化妝品防脫發(fā)成分

  • 防脫發(fā)測試方法

    • 藥監(jiān)局方法

    • 動物、離體或體外測試方法

脫發(fā)的原因

頭發(fā)的正常生長周期依賴于毛囊的不斷自我更新,包括生長期、退行期、休止期。但由于各種原因,當(dāng)退行期和生長期的頭發(fā)的動態(tài)平衡被打破時,就會導(dǎo)致頭發(fā)過度脫落或突然異常脫落。

頭發(fā)脫落包括生理性和病理性兩種類型。生理性脫發(fā)是指正常新陳代謝狀態(tài)下的頭發(fā)脫落,正常成年人每天脫發(fā)在100根以內(nèi)屬于正常的新陳代謝活動;而病理性脫發(fā)則指頭發(fā)脫落的數(shù)量超過正常情況,包括雄激素脫發(fā)(又叫脂溢性脫發(fā),AGA)、營養(yǎng)代謝性脫發(fā)、斑禿(俗稱“鬼剃頭”)、精神性脫發(fā)、物理性脫發(fā)、化學(xué)性脫發(fā)、感染性脫發(fā)等。

脫發(fā)的誘因很多,主要包括頭皮毛囊對二氫睪酮的敏感性增強(qiáng)、自身免疫反應(yīng)、激素紊亂、遺傳問題、環(huán)境因素、藥物、營養(yǎng)缺乏和壓力等。

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雄激素脫發(fā)

雄激素性脫發(fā)(簡稱AGA)是一種雄激素依賴的常染色體顯性多基因遺傳性脫發(fā),發(fā)生時常伴隨著油脂分泌旺盛,也稱為脂溢性脫發(fā)。往往男性出現(xiàn)較多,出現(xiàn)頭發(fā)變稀,發(fā)際線呈M狀后移,直至前部頭發(fā)完全脫落的情況。主要原因是雄激素二氫睪酮(DHT)與其受體(AR)結(jié)合形成DHT-AR復(fù)合體,DHT-AR復(fù)合體會刺激毛囊真皮乳頭細(xì)胞(DPC)分泌轉(zhuǎn)化生長因子β1(TGF-β1),使毛囊由生長期向退行期轉(zhuǎn)化。

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免疫性脫發(fā)

免疫性脫發(fā)又稱神經(jīng)性脫發(fā)或斑禿,即頭發(fā)在短時間內(nèi)成片脫落,露出一塊塊頭皮的情況,是一種T細(xì)胞介導(dǎo)的毛囊自身免疫性疾病。其發(fā)生機(jī)制主要和免疫系統(tǒng)有關(guān),發(fā)生時毛囊上皮細(xì)胞失去免疫赦免,受到攻擊,導(dǎo)致毛囊營養(yǎng)不良和生長期縮短,進(jìn)而出現(xiàn)頭發(fā)短期脫落。

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其他原因

營養(yǎng)不良、微量元素缺乏、外界刺激、疾病或藥物、精神壓力與情緒等也可能會導(dǎo)致自身毛發(fā)周期紊亂,使得大量處于生長期的頭發(fā)同時進(jìn)入休止期,同步脫落。鐵元素、維生素B2、鋅元素、蛋白質(zhì)等營養(yǎng)物質(zhì)的缺失與脫發(fā)的關(guān)系,特別是鐵元素缺乏在女性脫發(fā)中較為普遍,與此同時某些營養(yǎng)物質(zhì)如維生素A的過度攝入也可能對毛發(fā)生長產(chǎn)生負(fù)面作用。精神壓力過度會導(dǎo)致頭部血管長期處于收縮狀態(tài),血液循環(huán)不良,頭發(fā)營養(yǎng)供應(yīng)不足,同時壓力可通過影響毛囊中的巨噬細(xì)胞和/或肥大細(xì)胞抑制毛發(fā)生長;在壓力作用下,體內(nèi)神經(jīng)肽分子P物質(zhì)增加,直接或間接抑制角質(zhì)形成細(xì)胞增殖并誘導(dǎo)其凋亡。

防脫發(fā)機(jī)理

抗雄激素作用

雄激素性脫發(fā)(AGA)是較為常見也是醫(yī)學(xué)研究較多的脫發(fā)類型,抗雄激素成為許多防脫發(fā)產(chǎn)品的主要靶點(diǎn)。醫(yī)學(xué)上主要的治療方式是使用5α-還原酶抑制劑,抑制5α-還原酶表達(dá)或阻斷雄激素與雄激素受體的結(jié)合。阻斷雄激素與其受體結(jié)合可通過抑制雄激素受體或競爭性結(jié)合雄激素受體來實(shí)現(xiàn)。

調(diào)控毛囊生長周期

Wnt/β-catenin信號通路在調(diào)控毛囊干細(xì)胞增殖和分化、毛囊形態(tài)變化和調(diào)控毛乳頭功能和調(diào)控周期等方面都有著重要作用,是從休止期向生長期轉(zhuǎn)變的重要信號通路之一。正常毛囊處于生長期時,β-catenin呈強(qiáng)表達(dá),而敲除毛乳頭中的β-catenin后,Wnt信號通路被抑制,毛囊會提早進(jìn)入退行期。

毛囊從生長期向退行期轉(zhuǎn)化的過程中,成纖維細(xì)胞生長因子5(FGF5)的存在起著決定性作用,轉(zhuǎn)化生長因子-β(TGF-β)、神經(jīng)營養(yǎng)因子(BDNF)等可以促進(jìn)毛發(fā)從生長期向退行期轉(zhuǎn)變。

此外,外根鞘中抗凋亡基因Bcl-XL或Bcl-2的過表達(dá),則會縮短毛發(fā)生長初期的持續(xù)時間,這表明外根鞘中細(xì)胞存活的調(diào)節(jié)也可能在控制毛發(fā)生長周期中發(fā)揮作用。因此,通過刺激毛發(fā)生長信號通路,如激活Wnt/β-catenin信號通路,或抑制生長期向退行期轉(zhuǎn)變的信號通路,如尋求合適的TGF-β抑制劑和受體競爭拮據(jù)劑、抑制細(xì)胞凋亡等,理論上可能對減少頭發(fā)脫落起到正向影響。

減少毛囊損傷

毛囊處如果產(chǎn)生炎癥反應(yīng)和氧化應(yīng)激、或者受到外界刺激等,會帶來損傷,從而導(dǎo)致毛囊功能異常并帶來脫發(fā)。因此,通過抗氧化、抗炎癥等作用,或修護(hù)頭皮屏障以減少和抵御外界刺激,可以有助于減少毛囊損傷,使毛囊維持正?;?。

改善微循環(huán)和能量代謝

毛發(fā)的生長依賴毛囊周圍的血管為其提供足夠的營養(yǎng)物質(zhì),同時毛發(fā)生長是極其耗能的過程,因此能量循環(huán)亦不可忽視。

血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)會增加血管通透性,誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞增殖,并刺激體內(nèi)毛細(xì)血管形成,將直接作用于真皮乳頭細(xì)胞或促進(jìn)微血管生成,促進(jìn)毛發(fā)生長;腺苷可以上調(diào)VEGF,促進(jìn)血液循環(huán),抑制TGF-β,從而減少脫發(fā)。

ATP敏感性鉀通道(KATP通道)是參與一系列生理過程的能量傳感器,通過降低鈣離子濃度,提高蛋白激酶A活性可以促進(jìn)血管舒張。米諾地爾最早利用其促進(jìn)血管擴(kuò)張的作用,用作降壓藥,后來發(fā)現(xiàn)其可以促進(jìn)毛囊細(xì)胞增殖來實(shí)現(xiàn)防脫發(fā)作用,目前是臨床上常用的治療脫發(fā)的藥物。

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防脫發(fā)成分

藥物防脫發(fā)成分

非那雄胺和米諾地爾是美國聯(lián)邦藥物管理局(FDA)批準(zhǔn)的用于治療脫發(fā)的兩種藥物。非那雄安是5-α還原酶抑制劑,米諾地爾可以通過擴(kuò)張血管改善微循環(huán)。然而,它們的療效存有爭議,且副作用比較明顯。服用非那雄胺(1mg/天)出現(xiàn)性功能障礙的風(fēng)險會增加。短期使用米諾地爾會導(dǎo)致脫發(fā),長期使用可能導(dǎo)致頭皮瘙癢和脫屑。它們目前只能在藥物中使用,而不能在化妝品中使用。

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非那雄胺

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米諾地爾

化妝品防脫發(fā)成分

化學(xué)成分

烏諾地爾(二氨基嘧啶氧化物)和尼諾地爾(即可比落,吡咯烷基二氨基嘧啶氧化物)以及腺苷等,是溫和的治療脫發(fā)的成分,結(jié)構(gòu)和功能與米諾地爾類似,可以作為米諾地爾的替代物,在防脫化妝品中使用。

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烏諾地爾

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尼諾地爾

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腺苷

植物或中草藥成分

相對而言,植物提取物取材方便、制作工藝簡單、作用溫和、副作用小,更多地被應(yīng)用到洗護(hù)產(chǎn)品中,其中使用頻次最高的三種植物提取物為:側(cè)柏葉提取物、生姜提取物和人參提取物

1.側(cè)柏葉

側(cè)柏葉是一味常用的治療脫發(fā)的中藥,《中藥八百種詳解》著:鮮側(cè)柏葉切碎后浸于60%-75%酒精中7天,用濾液涂搽患處,治療斑禿160例,顯效33例,有效91例,總有效率77.5%。

側(cè)柏葉的化學(xué)成分復(fù)雜,包括黃酮類化合物、揮發(fā)油、鞣質(zhì)等。側(cè)柏烯、黃酮類和VC等成分具有抑菌抗炎、擴(kuò)張血管、祛屑防脫及增生須發(fā)等功效。

現(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究已發(fā)現(xiàn),側(cè)柏葉中的黃酮成分可激活毛母細(xì)胞,促進(jìn)血液循環(huán),改善毛囊發(fā)育和生長,使毛發(fā)生長能力衰退的毛囊復(fù)活,為復(fù)活的毛囊補(bǔ)充營養(yǎng)成分而發(fā)揮養(yǎng)發(fā)、生發(fā)的作用。

側(cè)柏葉中的雪松醇、槲皮苷和穗花杉雙黃酮具有促進(jìn)細(xì)胞自噬的活性,毛乳頭細(xì)胞自噬障礙可能是雄激素性脫發(fā)的潛在機(jī)制,誘導(dǎo)毛乳頭細(xì)胞自噬可以防脫發(fā)。

2.人參

人參被稱為“百草之王”,使用人參養(yǎng)生治病的歷史已有兩千多年。

人參育發(fā)防脫的機(jī)制主要體現(xiàn)在兩個方面:

首先,人參提取物中含有與雌激素有關(guān)的植物激素,可改善頭皮血液循環(huán),并調(diào)節(jié)免疫力,促進(jìn)毛發(fā)生長;

其次,其中富含的人參皂苷成分對毛囊間充質(zhì)干細(xì)胞具有促增殖作用,能夠減少生長期毛囊角質(zhì)形成細(xì)胞凋亡和退行性變,促進(jìn)毛囊生長。

3.生姜

生姜別名姜根、百云辣等,其提取物中含有多種生物活性成分,如揮發(fā)油、姜辣素、二苯基庚烷及黃酮類化合物等。

姜辣素的主要成分為6-姜酚,具有消炎等功效。6-姜酚能夠促進(jìn)局部血液循環(huán)加快,給毛囊提供更多營養(yǎng)來源,促進(jìn)頭發(fā)生長。

生姜中含有姜烯酮、姜醇等幾十種芳香物質(zhì),對皮炎有抑制作用。

此外,姜根提取物對皮膚癬菌有一定抑制作用,可增強(qiáng)皮膚活性,也可用作抗衰劑、抗氧劑。

姜的1,3-丙二醇提取物可促進(jìn)HDPCs分泌VEGF。VEGF是一種細(xì)胞生長因子,可刺激血管生成、強(qiáng)化毛囊營養(yǎng)素的供應(yīng),為毛發(fā)提供適宜的生長環(huán)境,進(jìn)而達(dá)到防脫發(fā)效果。

但是也有文獻(xiàn)顯示,生姜中的6-姜酚可能會抑制毛發(fā)生長。

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不過文獻(xiàn)中使用的是小鼠觸須毛囊進(jìn)行的離體實(shí)驗(yàn),能否代表人體頭發(fā)毛囊也還值得討論。因?yàn)槿梭w雄激素會導(dǎo)致脫發(fā),卻不會影響胡須,甚至?xí)尯毟?。那么,小鼠的毛發(fā)和胡須是不是也有區(qū)別?活性成分對人和小鼠的毛囊是不是有相同的效果?這些問題都值得研究。所以生姜提取物的防脫發(fā)功效,以及是否會抑制頭發(fā)生長,還需要更多的探討。

4.當(dāng)歸

含揮發(fā)油、糖、氨基酸、腺嘌呤、維生素B、葉酸等活性成分,能顯著促進(jìn)血紅蛋白及紅細(xì)胞的生長,能擴(kuò)張外圍血管,緩解外圍血管平滑肌痙攣,增加血流量。具補(bǔ)血、活血抑菌、消炎作用,能擴(kuò)張血管,促進(jìn)血液循環(huán)?!侗静菥V目》載“澤皮膚,去痰生新,溫中脊血,活血舒筋。”

5.何首烏

何首烏含蒽醌衍生物,主要為大黃酚和大黃瀉素,又含大黃酸、大黃瀉素甲醚,以及含磷脂、粗脂肪等。所含卵磷脂為構(gòu)成神經(jīng)組織的主要成分,有強(qiáng)壯神經(jīng)的作用,同時為血球及其他細(xì)胞膜的重要原料,能促進(jìn)血細(xì)胞的生長與發(fā)育,能生精養(yǎng)血,是歷來中國傳統(tǒng)生發(fā)、烏發(fā)之主藥,治斑禿尤為必不可少之品?!吨形麽t(yī)結(jié)合雜志》載:何首烏水煎醇提液(1g/mL)有促進(jìn)造血功能,對粒系祖細(xì)胞的生長有促進(jìn)作用。

何首烏提取物能夠刺激成纖維細(xì)胞生長因子-7的表達(dá),促進(jìn)毛發(fā)生長。

它還可以上調(diào)人毛乳頭細(xì)胞血管內(nèi)皮生長因子,減少雄激素受體的產(chǎn)生,延緩毛囊退行性變。

此外,何首烏提取物還可以起到抑制5α-還原酶的作用。

6.艾葉

艾葉提取物在防脫發(fā)的中藥復(fù)方中常見,但其具體作用機(jī)理尚不明確。

7.川芎

川芎:主要化學(xué)成分為川芎肉酯、生物堿川芎嗪(四甲基吡嗪)及阿魏酸和葉酸等成分,具有減少過氧化脂含量及改善微循環(huán)、擴(kuò)張血管和增加血流量等作用,其水浸劑在體外對多種皮膚真菌有抑制作用。阿魏酸能使血小板內(nèi)CAMP含量升高,對磷酸二酯酶有抑制作?!侗静菥V目》載川芎可以“長肉排脹,消淤血?!?/p>

8.知母

知母含有多種知母皂苷,具有抑菌、活血、抑制雄性激素活化和抗炎作用。

9.紅花

具有抑制雄性激素活化、活血和抗炎作用。

10.龍血竭/麒麟竭

具有活血作用,能抑制血小板聚集,促進(jìn)毛囊干細(xì)胞的增殖和分化。

11.澤瀉

含澤瀉醇,具有抑制血管收縮、增加血流的作用。

12.大薊

主要成分為單紫杉烯及其衍生物,含三萜化合物和甾醇、乙酸蒲公英甾醇酯、β-谷甾醇等,有活血散瘀作用。

13.款冬

具有擴(kuò)張毛細(xì)血管,增加毛細(xì)血管血流,促進(jìn)毛根活性的作用。

14.日本獐芽菜

獐牙菜的主要活性成分是齊墩果酸和獐牙菜苦苷,可以抑制5α-還原酶。

15.決明子

含有大黃素等活性成分,具有抑制真菌的作用,可以作為頭發(fā)生長刺激劑和5α-還原酶抑制劑。

16.魚腥草

魚腥草可增加線粒體膜電位(MMP)、刺激還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)和三磷酸腺苷(ATP)的產(chǎn)生,從而起到改善能量代謝的作用。

17.黃岑

黃岑中的黃芩苷可以激活Wnt/β-catenin信號通路,增加毛乳頭細(xì)胞中促進(jìn)胰島素樣生長因子TGF-1和VEGF的表達(dá),增強(qiáng)堿性磷酸酶(ALP)活性,誘導(dǎo)毛囊由休止期向生長期轉(zhuǎn)變。

18.紅車軸草

紅車軸草中的異黃酮具有5α-還原酶抑制作用,有助于防止雄激素性脫發(fā)。

19.韓國紅參

韓國紅參提取物通過調(diào)節(jié)線粒體凋亡通路表達(dá)來防止毛囊過早進(jìn)入退行期,具有抗凋亡活性,同時人參皂苷可以抑制TGF-β誘導(dǎo)的細(xì)胞外調(diào)節(jié)蛋白激酶磷酸化。

20.其他

地骨皮、茶、柴胡、山葡萄根、黃柏、辣椒、苦參、丹參、天麻、紫松果菊等眾多提取物,可以通過改善頭皮血液微循環(huán),提高毛囊細(xì)胞的活性、抗氧化等不同機(jī)制,減少脫發(fā)的發(fā)生。

有文獻(xiàn)對55中不同的中藥提取物進(jìn)行了防脫發(fā)效果比較,其中齊墩果酸、女貞子、白芷、白芨、荊芥、黃芪、潼蒺藜、甘草酸、人參等成分,表現(xiàn)出了顯著的防脫發(fā)效果。

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防脫發(fā)測試方法

法規(guī)測試方法(人體測試)

2021年藥監(jiān)局將化妝品防脫發(fā)測試方法納入化妝品安全技術(shù)規(guī)范,詳細(xì)介紹了化妝品防脫發(fā)人體功效測試的方法。

https://www.nmpa.gov.cn/xxgk/ggtg/hzhpggtg/jmhzhptg/20210302174406138.html

法規(guī)防脫發(fā)測試方法主要內(nèi)容摘錄如下:

試驗(yàn)器材:

專業(yè)數(shù)碼相機(jī):像素不低于1500萬,整個試驗(yàn)過程中包括光圈大小、感光度(ISO)及焦距等參數(shù)保持一致。圖像拍攝支架:能夠固定受試者頭部位置,使頭頂與相機(jī)鏡頭保持垂直,配合專業(yè)數(shù)碼相機(jī)以頭頂為中心拍攝全部頭發(fā)照片。

皮膚鏡:LED燈光源,波長450~750nm,色溫6500~8000K,照度不低于540lx,放大倍數(shù)≥20倍,檢測直徑不小于1.0cm或面積不少于0.8cm2。

梳子:梳齒密度適中(齒間距0.9~1.1mm),梳齒長度為2.0~3.0cm,梳子長度不少于10cm(不含梳子把柄)。

環(huán)境條件

試驗(yàn)結(jié)果觀察應(yīng)在溫度為21±1℃、相對濕度為50±10%RH的環(huán)境下進(jìn)行,視覺評估應(yīng)在恒定光照條件(色溫5500~6500K的日光燈管或LED光照)下進(jìn)行,受試者應(yīng)在此環(huán)境條件下適應(yīng)至少30分鐘后方可進(jìn)行評估和測試。

試驗(yàn)流程

  1. 按照要求招募入組志愿受試者。
  2. 合格受試者進(jìn)行2周洗脫期,洗脫期結(jié)束后再次進(jìn)行60次梳發(fā)法,脫發(fā)計(jì)數(shù)仍大于10根者才能進(jìn)入正式試驗(yàn)。
  3. 入選正式試驗(yàn)的受試者按照分層隨機(jī)法分為試驗(yàn)產(chǎn)品組和對照產(chǎn)品組,確??赡苡绊懺囼?yàn)結(jié)果的重要因素(性別、年齡、頭發(fā)長度、脫發(fā)嚴(yán)重程度等)的平衡。
  4. 對入選受試者進(jìn)行使用產(chǎn)品前毛發(fā)基礎(chǔ)值評估,包括脫發(fā)計(jì)數(shù)、毛發(fā)密度評估和圖像拍攝,并記錄;產(chǎn)品使用后4周、8周、12周再次進(jìn)行相同的評估和測試。

測量指標(biāo):

脫發(fā)計(jì)數(shù):受試者每次訪視時由經(jīng)過培訓(xùn)的工作人員采用60次梳發(fā)法梳理受試者頭發(fā),對脫落頭發(fā)計(jì)數(shù),并記錄。

毛發(fā)密度評估:毛發(fā)密度評估包括整體毛發(fā)密度評估和局部毛發(fā)密度評估,具體方法如下:

整體毛發(fā)密度:

受試者頭頂頭發(fā)向兩側(cè)對稱梳開并保持順暢,每次訪視評估必須保持相同的發(fā)型(參考首次拍攝的全頭頭發(fā)照片),采用下表的0~7級評估量表評價頭頂區(qū)域頭發(fā)密度。

毛發(fā)密度分級評分表:

分級描述
0無頭發(fā)
1極稀疏,頭皮清晰可見
2稀疏,容易看到頭皮
3偏稀疏,可見頭皮
4中等密度,可見少量頭皮
5偏稠密,可見極少量頭皮
6稠密,頭皮隱約可見
7非常稠密,頭皮幾乎不可見

整體毛發(fā)密度評估包括臨床評估和圖像評估,計(jì)算兩者的均值作為整體毛發(fā)密度。

視覺評估:每次訪視時由皮膚科醫(yī)生現(xiàn)場對毛發(fā)密度進(jìn)行評估,并記錄評分等級。

圖像評估:每次訪視時,拍攝全頭頭發(fā)照片。具體操作步驟:受試者穿上黑色無反光圍脖,并將頭發(fā)梳理順暢(每次發(fā)型保持一致,回訪拍照參照首次拍攝照片),下巴置于拍攝支架上,固定數(shù)碼相機(jī)拍攝參數(shù),以頭頂為中心拍攝全頭頭發(fā)照片。每次拍照時,需要貼上標(biāo)簽,包括試驗(yàn)編號、受試者編號和訪視時間,并設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)色板(至少含有黑色、白色和灰色)。訪視全部結(jié)束后,由皮膚科醫(yī)生對拍攝的照片進(jìn)行毛發(fā)密度評估,并記錄評分等級。

局部毛發(fā)密度:

受試者頭部固定一塊至少1.5cm*1.5cm的剪發(fā)區(qū)域(頭頂偏顳側(cè)),做好定位,每次訪視時,保證剪除毛發(fā)區(qū)域一致,毛發(fā)剪至殘留長度不超過1mm;圖像采集過程中,操作人員需要讓受試者處于一個舒適的體位,將皮膚鏡置于剪除毛發(fā)區(qū)域正中央進(jìn)行局部頭發(fā)圖像拍攝,拍攝時皮膚鏡鏡頭與頭皮完全貼合且保持垂直,并檢查拍攝圖像的清晰度。用圖像分析軟件或者人工計(jì)數(shù)方法,計(jì)數(shù)局部毛發(fā)數(shù)量和密度,并記錄。

結(jié)果評判:

根據(jù)數(shù)據(jù)分析結(jié)果,試驗(yàn)期間任何訪視時間點(diǎn),使用試驗(yàn)產(chǎn)品前后脫發(fā)計(jì)數(shù)無顯著增加或前后脫發(fā)計(jì)數(shù)差值(產(chǎn)品使用后某一訪視時間點(diǎn)的脫發(fā)計(jì)數(shù)-產(chǎn)品使用前的脫發(fā)計(jì)數(shù))顯著低于對照組(P<0.05);又或者毛發(fā)密度(整體毛發(fā)密度或局部毛發(fā)密度)無顯著減少、或前后毛發(fā)密度差值(產(chǎn)品使用后某一訪視時間點(diǎn)的毛發(fā)密度-產(chǎn)品使用前的毛發(fā)密度)顯著高于對照組(P<0.05),則認(rèn)定試驗(yàn)產(chǎn)品有防脫發(fā)功效,否則認(rèn)為試驗(yàn)產(chǎn)品無防脫發(fā)功效。

動物、離體或體外測試方法

動物實(shí)驗(yàn)通常選擇雄性小鼠或大鼠為研究對象,隨機(jī)分為空白組、模型組、對照組、測試組等,經(jīng)過不同的處理方式,對比小鼠或大鼠的毛發(fā)生長情況,同時也可測試不同組別局部皮膚組織的睪酮、二氫睪酮,以及其他生物信號因子如HGF等的表達(dá),常用于雄激素脫發(fā)的相關(guān)研究。

離體試驗(yàn)通常是從人體或動物分離處于生長期(一般是生長期Ⅵ)的毛囊進(jìn)行培養(yǎng),通過測試組和對照組的對比進(jìn)行評估,表征指標(biāo)包括毛發(fā)生長情況、生長期持續(xù)時間、特定細(xì)胞增殖和凋亡情況以及一些信號分子的表達(dá)等。

體外試驗(yàn)多通過對間接指標(biāo)的表征來反映防脫發(fā)功效:

對5α-還原酶的抑制作用評估:對從雄性大鼠或小鼠去除前列腺,經(jīng)過一些列處理制得5α-還原酶提取液,將睪酮作為標(biāo)定物,在相同反應(yīng)條件下,對比不同測試樣品或?qū)φ?,樣品處理后未被還原的睪酮含量,從而評估樣品對5α-還原酶的抑制作用。

抗氧化作用評估:可選擇DPPH自由基清除試驗(yàn),分別取固定量的待測樣品和對照樣品,加入一定量固定濃度的DPPH溶液,在室溫黑暗處反應(yīng)一定時間于517nm處測定光吸收值,對比測試測樣品和空白樣品,計(jì)算自由基清除率,評估抗氧化作用。或以真皮乳頭細(xì)胞為對象,用相同濃度的過氧化氫以及待測樣品或?qū)φ諛悠钒匆欢鞒烫幚砣苏嫫と轭^細(xì)胞,通過CKK-8法檢測細(xì)胞存活率評估抗氧化損傷能力,或用相同濃度的過氧化氫和待測樣品或?qū)φ諛悠钒匆欢鞒烫幚砣苏嫫と轭^細(xì)胞,使用活性氧檢測試劑盒檢測ROS含量。

能量供應(yīng)及微循環(huán)情況評估:分別用待測樣品和對照樣品按一定流程處理人真皮乳頭細(xì)胞,再使用線粒體膜電位測定試劑盒測得線粒體膜電位變化;或按照一定流程處理人真皮乳頭細(xì)胞,用CellTiter-Glo試劑盒測得測試樣品對ATP濃度的影響;或分別用待測樣品和對照樣品按一定流程處理人真皮乳頭細(xì)胞,再用Elisa試劑盒測定VEGF濃度。

抗炎作用評估:以成纖細(xì)胞為研究對象,分別用待測樣品和對照樣品按一定流程處理,再用促炎因子處理,然后測定炎癥因子的釋放情況。此外,也可通過RT-PCR法測定其他因子如KGF、IGF、HGF等和生長周期相關(guān)的信號因子的釋放;通過分離毛囊細(xì)胞RNA,逆轉(zhuǎn)錄成cDNA,再經(jīng)過PCR分析測定角蛋白的表達(dá)評估毛發(fā)生長健康狀況;以成纖維細(xì)胞為研究對象,用熒光標(biāo)記法評估對細(xì)胞外基質(zhì)的表達(dá)影響從而評估毛發(fā)與毛囊的結(jié)合狀態(tài)等。

體外測試可以實(shí)現(xiàn)對大量活性物或組合進(jìn)行篩選,但最終的功效確認(rèn),還是需要通過人體測試來進(jìn)行驗(yàn)證。

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