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抗體保存得當(dāng)與否,直接決定了抗體的活性和使用效果!如果抗體保存得當(dāng),大部分抗體活性都可以維持?jǐn)?shù)月甚至數(shù)年。請(qǐng)謹(jǐn)記!無(wú)論何時(shí)(請(qǐng)按照說(shuō)明書(shū)推薦的保存條件正確保存抗體) 1. 收到抗體后請(qǐng)務(wù)必在 12000rpm 離心 1-5 分鐘后再打開(kāi)管蓋進(jìn)行分裝和保存(如果抗體體積小于50ul,請(qǐng)延長(zhǎng)離心時(shí)間至 5 分鐘,以保證全部抗體均離心下來(lái))! 為了昂貴&珍貴的抗體,請(qǐng)看清是12000rpm 2. 對(duì)于大部分抗體,比較合適的保存方式是分裝后保存在-20℃或-80℃。
3. 大部分抗體收到后 4℃短暫保存1-2周對(duì)抗體活性是沒(méi)有影響的。 如果抗體很快(1-2 周)會(huì)使用,推薦在4℃保存,這是為了避免反復(fù)凍融對(duì)抗體活性的損害。如果要長(zhǎng)期保存則最好是在-20℃ or -80℃。最關(guān)鍵的一點(diǎn)是要根據(jù)說(shuō)明書(shū)推薦的方式來(lái)正確的保存抗體! 但是,腹水形式的產(chǎn)品請(qǐng)?jiān)谑盏胶罅⒓磧銎饋?lái)!因?yàn)樵擃惍a(chǎn)品含有大量的蛋白酶,長(zhǎng)期在4℃保存會(huì)導(dǎo)致抗體的降解! 4. 大部分抗體的運(yùn)輸條件:一般的運(yùn)輸過(guò)程需要1-2周的時(shí)間,所以是在4℃的條件下來(lái)完成的。4℃運(yùn)輸最主要的目的是為了避免反復(fù)凍融對(duì)抗體活性的損害(如果使用干冰運(yùn)輸,那么收到時(shí)抗體是凍起來(lái)的,為了分裝就需要解凍。這就多了一次凍融的過(guò)程)。 所以運(yùn)輸過(guò)程中絕對(duì)避免干冰運(yùn)輸! 特殊抗體的保存條件:
抗體保存其它相關(guān)信息: 關(guān)于加入甘油保存:有些人會(huì)加 50%的甘油到抗體中來(lái)避免反復(fù)凍融,甘油在-20℃會(huì)降低冰點(diǎn)。這對(duì)很多抗體可能是可行的。加入甘油的溶液不建議在-80℃保存,因?yàn)檫@已經(jīng)超過(guò)了甘油的冰點(diǎn)。如果您要加入甘油來(lái)保存抗體的話,請(qǐng)謹(jǐn)慎注意無(wú)菌操作,避免污染! 關(guān)于蛋白保護(hù)劑: 蛋白在高濃度時(shí)更不容易降解(1 mg/ml 或者更高),這就是為什么在抗體中加入 BSA 之類作為穩(wěn)定劑的原因了;另一方面,加入的蛋白也可以減少抗體由于管壁吸附所造成的損失。但是如果抗體要用來(lái)標(biāo)記的話,則不能加入蛋白穩(wěn)定劑,因?yàn)檫@些穩(wěn)定劑會(huì)和抗體一起競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合標(biāo)記物。 關(guān)于疊氮化鈉(sodium azide)的使用:為了防止微生物污染,疊氮化鈉經(jīng)常被加入到抗體中(終濃度 0.02% (w/v))。 在下述情況中不能使用疊氮化鈉:
疊氮化鈉在抵抗微生物的同時(shí),對(duì)其它大部分有機(jī)物也是有毒的, 因?yàn)樗钄嗔司€粒體的 cytochrome electron transportsystem.
注:疊氮化鈉的去除方式: 可以通過(guò)凝膠電泳或過(guò)濾的方式去除!IgG 的分子量是 150kDa (IgM 是~ 600kDa); 疊氮化鈉的分子量只有65Da。使用 cut off 14kDa 的濾膜即可將疊氮化鈉從抗體中去除。
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